亚洲中文字幕无码自拍一拍五月,欧美亚洲色综久久精品国产 ,国产亚洲精品久久久久久无码下载,亚洲欧洲精品a片久久99

免費(fèi)咨詢熱線:
技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)中心 > 流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

流式細(xì)胞儀檢測樣品的制備方法

 更新時(shí)間:2022-01-14 點(diǎn)擊量:1637
  流式細(xì)胞檢測樣品推薦制備方法:
 
  A. 直接標(biāo)記抗體(FITC標(biāo)記抗體):
 
  (1) 、收集1×106個(gè)細(xì)胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
 
  (2) 、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞,800rpm離心5min。
 
  (3) 、用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
 
  (4) 、用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  B. 未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法:
 
  (1)、收集2×106個(gè)細(xì)胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,800rpm離心5min。
 
  (2)、用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細(xì)胞,800rpm離心5min;
 
  (3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
 
  (4)、加入飽和劑量未標(biāo)記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復(fù)一次。
 
  (5)、加入熒光標(biāo)記(FITC)標(biāo)記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
 
  (6)、加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞;固定待測。
 
  (7)、流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
 
  C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
 
  (1)、待測樣本制成單細(xì)胞懸液,然后2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,棄上清。
 
  (2)、用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時(shí)。
 
  (3)、調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升,取1毫升細(xì)胞懸液,用PBS洗三次,細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
 
  (4)、PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
gogo全球大胆高清人体444| 成熟YIN荡美妞A片视频麻豆| 老太脱裤子让老头玩XXXXX| 美女又黄又免费的视频| 亚洲AV人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲熟妇无码AV不卡在线播放| 国产又粗又猛又大爽又黄| 乱人伦精品视频在线观看| 久久久无码人妻精品无码| 亚洲国产日韩a在线欧美2020| 沟厕欣赏女尿高清11分钟| 国产另类ts人妖一区二区| 国产精品H片在线播放| 趁我睡着偷偷进到身体里了| 免费精品国产人妻国语| 国产精品日韩欧美一区二区三区 | 99久久精品费精品国产一区二区| 宝贝乖女小芳H| 国产草草影院ccyycom| 最近中文字幕视频高清| 少妇又色又紧又爽又刺激视频| 欧美激情AAAAAAAA片| 久久妇女高潮喷水多长时间| 花蜜花液汁水野战高H| 精品欧美一区二区三区成人片在线| CHINESE老女人老熟妇HD| 精品亚洲AV一区二区夜夜爽 | 无码国内精品人妻少妇蜜桃视频| Y111111少妇影院无码| 女人与公狍交酡过程高清视频| 在线看免费做爰60分钟视频| 欧美激情A∨在线视频播放| 亚洲国产精品SUV| 久久不射| 国产猛烈高潮尖叫视频免费| JAPANESE极品丰满少妇| 成人性生交大片免费看视频 | 麻豆AV福利AV久久AV| 被闺蜜男朋友强肉H高干 | 亚洲AV区无码字幕中文色| 国产欧美一区二区精品久久久|